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問(wèn)答題欲將一真核生物的結(jié)構(gòu)基因克隆后轉(zhuǎn)移到原核生物（如 E．coli）中進(jìn)行表達(dá)，克隆時(shí)應(yīng)注意哪些問(wèn)題？

1.問(wèn)答題用限制性?xún)?nèi)切核酸酶切割 DNA 后，經(jīng)電泳檢查，發(fā)現(xiàn)有拖尾現(xiàn)象，其可能的原因是什么？

2.問(wèn)答題在構(gòu)建cDNA文庫(kù)時(shí)，為什么常用GC接尾而不用AT接尾法連接？

3.問(wèn)答題Muller的PCR 反應(yīng)同大腸桿菌體內(nèi)的 DNA復(fù)制有哪些不同？你認(rèn)為根本的差別在哪里？

4.問(wèn)答題何謂 YAC？主要特性是什么？

（1）含有來(lái)自其他生物 DNA的酵母人工染色體，叫 YAC；
（2）主要特性是可以克隆較大的外源片段。

5.問(wèn)答題酵母人工染色體要在酵母細(xì)胞中穩(wěn)定存在，必須有哪些基本的結(jié)構(gòu)？

（1）著絲粒；
（2）端粒；
（3）ARS序列。