A.催化一條雙鏈DNA3′端羥基與另一條雙鏈DNA5′端磷酸根形成3′,5′磷酸二酯鍵
B.TaqDNA聚合酶具有3′→5′外切酶活性,PCR擴(kuò)增過程中有校正功能
C.增加酶量可以提高反應(yīng)速度,減少堿基錯(cuò)配
D.擴(kuò)增的DNA片段越長,錯(cuò)配概率越大,每次循環(huán)移碼突變率為1/8000左右
E.在引物的3′-OH末端加入脫氧單核苷酸,形成3′,5′磷酸二酯鍵
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A.巢式PCR多用于比較難于擴(kuò)增或含量比較低的模板
B.進(jìn)行兩輪擴(kuò)增,第1次擴(kuò)增的片段較第2次小
C.兩次擴(kuò)增的引物相同
D.巢式PCR比常規(guī)PCR更不容易出現(xiàn)污染
E.第1次擴(kuò)增的產(chǎn)物作為第2次擴(kuò)增的引物
A.引物濃度
B.初始模板量
C.TaqDNA聚合酶濃度
D.Mg濃度
E.反應(yīng)變性的時(shí)間
A.是擴(kuò)增曲線與熒光本底基線的交叉點(diǎn)處相應(yīng)的反應(yīng)循環(huán)數(shù)
B.可以根據(jù)Ct值的大小估計(jì)模板的初始量
C.Ct值大小與模板量呈正比,Ct值越大,模板量越多
D.是定量PCR外參照系統(tǒng)中重要的參數(shù)
E.Ct值大小與模板量呈反比,Ct值越小,模板量越多
A.可以定量或半定量檢測(cè)PCR產(chǎn)物的方法
B.定量PCR主要進(jìn)行基因表達(dá)的分析和病原體的核酸檢測(cè)
C.水解探針技術(shù)中TaqMan探針的位置位于兩條引物之間
D.分子信標(biāo)在自由狀態(tài)下為發(fā)夾結(jié)構(gòu),熒光信號(hào)極低
E.定量PCR在封閉狀態(tài)下進(jìn)行,有效避免了產(chǎn)物的實(shí)驗(yàn)室污染
A.首先應(yīng)將RNA轉(zhuǎn)化為cDNA才能進(jìn)行PCR
B.除了使用DNA聚合酶外,還應(yīng)使用反轉(zhuǎn)錄酶
C.常用的反轉(zhuǎn)錄酶有AMV、MMLV,它們作用的最適溫度不同
D.Oligo(dT)引發(fā)的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)理論上是細(xì)胞內(nèi)所有mRNA的反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
E.反轉(zhuǎn)錄酶不需要引物即可進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
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