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問答題假定你分離到一個E．coli 的 Thy-突變體，并推測有可能是ThyA 基因突變。請設(shè)計一個方案用PCR從染色體DNA擴(kuò)增突變的ThyA 基因，測定突變的序列。（注：E．coli 野生型的 ThyA 基因的序列是已知的）

1.問答題欲將一真核生物的結(jié)構(gòu)基因克隆后轉(zhuǎn)移到原核生物（如 E．coli）中進(jìn)行表達(dá)，克隆時應(yīng)注意哪些問題？

2.問答題欲將一真核生物的結(jié)構(gòu)基因克隆后轉(zhuǎn)移到原核生物（如 E．coli）中進(jìn)行表達(dá)，克隆時應(yīng)注意哪些問題？

3.問答題用限制性內(nèi)切核酸酶切割 DNA 后，經(jīng)電泳檢查，發(fā)現(xiàn)有拖尾現(xiàn)象，其可能的原因是什么？

4.問答題在構(gòu)建cDNA文庫時，為什么常用GC接尾而不用AT接尾法連接？

5.問答題Muller的PCR 反應(yīng)同大腸桿菌體內(nèi)的 DNA復(fù)制有哪些不同？你認(rèn)為根本的差別在哪里？